Single-chain variable fragment
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정의:
Single-chain variable fragment, 또는 scFv라고 불리는 것은 사실 항체의 특정 fragment를 의미하지는 않고, heavy chain의 variable region ()과 light chain의 variable region ()이 연결된 fusion protein 이다.
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특징:
Constant region 없이 linker peptide로 연결된 scFv는 original antibody의 specificity를 그대로 유지하는 것으로 알려져있다.
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만드는 이유:
Original antibody 형태가 아닌 scFv 형태로 발현하는 이유는, 발현이 좀 더 쉽기 때문이다.
특히 phage display 와 같은, 박테리아에서 발현시킬 때 하나의 chain만 발현하도록 하는 것이 두 개의 chain을 발현해서 assembly를 유도하는 것보다 쉽다고 한다.
참고로 일반적인 monoclonal antibody는 mammalian cell culture에서 주로 발현하지만 scFv는 E. coli.와 같은 bacteria cell culture에서 주로 발현한다고 한다.
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용도:
scFv는 의약품으로도 사용되고 있고, flow cytometry, immunohistochemistry 등에도 사용된다.
의약품 예시: Pexelizumab, Brolucizumab
Linker peptide의 구성과 역할
from Wikipedia
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와 을 연결하는 linker peptide는 10~25개의 amino acid로 구성된다.
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Linker peptide에는 flexibility를 위해 Glycine이 많고, solubility를 위해 Serine이나 Threonine도 존재한다.
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의 C-terminus에 의 N-terminus를 연결하기도 하고, 의 C-terminus에 의 N-terminus를 연결하기도 한다.